Научный журнал
Международный журнал экспериментального образования

ISSN 2618–7159
ИФ РИНЦ = 0,757

ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРООБРАЗОВАНИЯ СЛЮННОЙ ЖИДКОСТИ ЗДОРОВЫХ МАЛЬЧИКОВ

Брилль Г.Е. 1 Раскина Е.Е. 1 Постнов Д.Э. 2 Львов Н.И. 1
1 ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» МЗ России
2 Национальный исследовательский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского
1. Постнова М.В, Мулик Ю.А, Новочадов В.В., Мулик А.Б., Назаров Н.О., Фролов Д.М. Ротовая жидкость как объект оценки ФС организма человека // Вестн. Волгогр. гос. ун-та. Сер. 3, Экон. Экол. – 2011. – № 1, № 18. – С. 246-253.
2. Шатохина С.Н. Функциональная морфология биологических жидкостей – новое направление в клинической лабораторной диагностике // Альманах клинической медицины. – 2008. – №18. – С. 50-56.
3. Шатохина С.Н., Шабалин В.Н. Морфология биологических жидкостей – новое направление в клинической медицине // Альманах клинической медицины. – 2003. – №6. – С. 404-422.
4. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека. – М.: Хризостом, 2001. – 303 с.
5. Раскина Е.Е., Брилль Г.Е. Влияние лазерной терапии на восстановительные процессы после перенесённых острых респираторных заболеваний и гриппа у часто болеющих школьников // Матер. ХХХIХ Международной научно-практической конференции «Применение лазеров в медицине и биологии». – Харьков, 2013. – С.60-62.
6. Раскина Е.Е., Брилль Г.Е. Метод объективного контроля эффективности лазерной профилактики инфекционных заболеваний у школьников // Матер. ХХХХ Международной научно-практической конференции «Применение лазеров в медицине и биологии». – Ялта, 2013. – С. 83-84.
7. Краевой С.А., Колтовой Н.А. Диагностика по капле крови. Кристаллизация биожидкостей. Москва, 2013. www.pdffactory.com.

В настоящее время одним из перспективных научных направлений в изучении патологических процессов является исследование морфологии биологических жидкостей, как носителей информации о внутренней среде организма [1, 7]. В последние годы В.Н. Шабалиным и С.Н. Шатохиной [2, 3, 4] внедрён метод клиновидной дегидратации биологических жидкостей, который даёт возможность получения интегральной информации, заложенной в особенностях морфологической картины твердой фазы (фации). По данным Е.Е. Раскиной и Г.Е. Брилля [5, 6], использование анализа фаций слюнной жидкости при проведении диспансеризации детей после перенесённых гриппа и ОРВИ может являться методом объективного контроля эффективности восстановительного лечения. В то же время необходимо отметить, что в возрастном аспекте закономерности структурообразования при дегидратационной самоорганизации слюнной жидкости изучены мало, что затрудняет интерпретацию паттернов, наблюдаемых в фациях детей при кристаллографии.

Целью данной работы явилось исследование возрастных особенностей кристаллографической картины фаций, полученных при дегидратационной самоорганизации слюнной жидкости здоровых мальчиков с использованием специальной компьютерной программы, позволяющей объективизировать данную технологию.

Материал и методы исследования. Проведено изучение 237 фаций слюны у 79 здоровых мальчиков. В группу раннего возраста (n=24) входили дети от 3 месяцев до 3 лет; в группу дошкольного возраста (n=30) входили дети от 3 до 7 лет. Старшая группа школьного возраста (n=25) включала детей от 7 до 11 лет. В исследование методом случайной выборки были включены здоровые мальчики, посетившие детскую поликлинику в фиксированные дни недели. Критериями включения в исследование были: здоровые дети, не имеющие острых заболеваний при осмотре и факта перенесённого инфекционного токсикоза в предшествующий период; без факторов риска социального анамнеза; отсутствием патологических состояний полости рта, заболеваний слюнных желёз, хронических заболеваний; при согласии родителей и детей на исследование. Критериями исключения детей из исследования были: острые заболевания, хронические заболевания; ожоги, травмы, инфекционный токсикоз, шок, синдром мультиорганной недостаточности в анамнезе; отягощённый социальный анамнез, наличие вредных привычек у школьников; отсутствие согласия на исследование.

Для исследования структурообразования слюнной жидкости использован метод клиновидной дегидратации биологических жидкостей В.Н. Шабалина и С.Н. Шатохиной [4]. Забор слюны (1,5-2 мл) проводился утром натощак с использованием одноразового стерильного устройства для сбора биологической жидкости. Слюнная жидкость помещалась в пластиковые пробирки и подвергалась центрифугированию в течение 10 мин при 3000 об/мин. Надосадочная жидкость (2 мкл) наносилась на поверхность сухого чистого обезжиренного предметного стекла полуавтоматическим дозатором (по 4 капли каждого образца) и в строго горизонтальном положении подвергалась высушиванию при комнатной температуре (20оС) в течение 24 часов. Для исследования фаций использовали микроскоп (Carl Zeiss, Jenna) с видеоокуляром (5 Мп) при конечном увеличении в 40 и 140 раз. Имидж-анализ фаций включал их качественную характеристику и расчёт количественных показателей с последующей статистической обработкой. Для количественной обработки фаций использовалась специальная компьютерная программа «FEXP» (Свидетельство о госрегистрации программы для ЭВМ № 2014610910 от 30 января 2014 г.). Кроме обработки интегральной картины фации, анализировались особенности отдельных её структур, для чего использовался интерактивный прямоугольный маркер. Рассчитывали ряд количественных параметров (в условных единицах): относительную площадь периферической (S1), промежуточной (S2) и центральной зоны (S3), нормированные на общую площадь фации; количество объектов (N), средний размер объектов (As), энтропия или коэффициент неоднородности поля яркости (Entr), фрактальная размерность (D corr), процент площади объектов ( %S) в каждой зоне фации. Статистическая обработка цифрового материала проведена с помощью математической программы «PRISM-4». Достоверными считались различия средних при р<0,05.

Результаты исследования. При микрооптической диагностике в фациях слюнной жидкости здоровых мальчиков четко визуализировались периферическая зона, или ободок (А), промежуточная (Б) и центральная зоны (В) (рис. 2, обзорный снимок). Их морфологические особенности положены в основу выделения двух типов фаций. В фациях первого типа периферическая зона представляла собой узкий ободок с чётким наружным контуром и площадью S1<0,25 (см. таблицу и рис. 1А, 1Б). Промежуточная зона при этом выявлялась в виде узкой линии. В центральной зоне фации обнаруживались свободно расположенные длинные, радиально ориентированные осевые кристаллы с отходящими, в основном под прямыми углами, боковыми короткими отростками в виде ветвей дерева или кустарника (так называемые скелетные или дендритные кристаллы). Боковые оси располагались параллельно друг другу, либо с одной стороны от основной оси, либо по обе стороны и напоминали «веточку ели». При увеличении в 140 раз визуализировались короткие отростки, параллельные основной оси и располагающиеся перпендикулярно к осям второго порядка (рис. 1В). Фации первого типа с преобладанием центральной зоны чаще встречались в группе детей раннего возраста (до 3 лет).

Ко второму типу отнесены фации, площадь периферической зоны которых была большей (S1>0,25). Ободок занимал до 30-50 % от всей площади фации, а площадь центральной зоны была меньше, чем в фациях первого типа (рис. 2А). Этот тип фаций чаще присутствовал у мальчиков дошкольного и школьного возраста (достоверность различий с группой мальчиков в возрасте до 3 лет соответственно р1<0,001 и р1<0,001). Промежуточная зона фаций второго типа визуально была четко структурирована и содержала плотно расположенные зернистые структуры, из которых берут начало стержневые оси, направляющиеся к центру фации (рис. 2Б). При большом увеличении «зернистость» представляла беспорядочное скопление множественных мелких округлых образований, количество которых увеличивалось с приближением к центральной зоне. По направлению к периферии из промежуточной зоны отходили мелкие ответвления, что делало границу между промежуточной и периферической зоной неровной. В центральной зоне выявлялись крупные ветвистые структуры по типу «еловых веток», содержащие один длинный осевой кристалл с ветвями второго и третьего порядка, а также крестообразные кристаллические структуры. Однако у школьников длинные прямые стержневидные образования были значительно крупнее (рис. 2В).

bril1.tif

Рис. 1. Фации 1 типа слюнной жидкости здоровых мальчиков до 3 лет: А – обзорный снимок, ув.40; Б – сегмент фации; В – центральная зона, фрагмент, ув.140

bril2.tif

Рис. 2. Фации 2 типа слюнной жидкости мальчиков старше 7 лет: 1 – обзорный снимок: А – ободок, Б – промежуточная зона, В – центральная зона; 2 – фрагмент ободка, ув.140; 3 – центральная зона, фрагмент, ув.140

Результаты количественной обработки фаций представлены в таблице. Как видно из таблицы, в группе мальчиков от 3 до 7 лет каких-либо изменений в структуре ободковой зоны фации, по сравнению с детьми до 3 лет, не отмечалось. В промежуточной зоне выявлялось только достоверное снижение показателя энтропии (p1<0,001). Наиболее существенные различия касались центральной зоны фации, где достоверно, по сравнению с мальчиками до 3 лет, уменьшалось количество объектов (p1<0,02), возрастал средний размер объектов (p1<0,02), снижался показатель энтропии (p1<0,001) и увеличивался процент площади фации, занятый объектами (p1<0,02).

Сравнительная характеристика количественных параметров фаций слюнной жидкости у здоровых мальчиков разного возраста

Возра-стная группа

S1

S2

S3

Ободковая

зона

Промежуточная

зона

Центральная

зона

N

AS

Entr

Dcor

%S

N

AS

Entr

Dcor

%S

N

AS

Entr

Dcor

%S

До 3 лет n=24

                                   

M

0,210

0,225

0,563

4,23

8035

0,155

1,975

89,2

9,26

3256

0,200

1,95

74,5

15,3

560

0,569

1,87

60,5

±m

0,015

0,022

0,024

1,04

939

0,043

0,007

2,65

1,66

856

0,028

0,008

2,78

1,43

42,7

0,041

0,008

1,26

3-7 лет n=30

                                   

M

0,283

0,234

0,481

3,77

6031

0,109

1,959

88,7

9,14

3966

0,081

1,939

76,1

11,1

792

0,422

1,891

65,4

±m

0,023

0,024

0,040

0,74

1004

0,016

0,010

2,24

2,52

1294

0,013

0,015

4,35

1,32

100

0,039

0,013

1,98

p1

<0,001

>0,5

>0,05

>0,5

>0,1

>0,2

>0,1

>0,5

>0,5

>0,5

<0,001

>0,5

>0,5

<0,02

<0,02

<0,001

>0,1

<0,02

7-11 лет

n=25

                                   

M

0,309

0,324

0,366

1,48

9925

0,023

1,979

94,5

7,17

3092

0,102

1,937

77,1

8,51

2227

0,454

1,875

65,3

±m

0,023

0,019

0,019

0,29

773

0,008

0,009

2,2

1,23

715

0,013

0,009

2,6

0,96

441

0,037

0,013

1,81

p1

<0,001

<0,001

<0,001

<0,01

>0,1

<0,001

>0,5

>0,1

>0,2

>0,5

<0,001

>0,2

>0,2

<0,001

<0,001

>0,5

>0,5

<0,02

p2

>0,2

<0,001

<0,001

<0,001

<0,001

<0,001

>0,1

>0,05

>0,2

>0,5

>0,2

>0,5

>0,5

>0,1

<0,001

>0,5

>0,2

>0,5

Примечание. р1 – достоверность различий с детьми до 3 лет; р2 – достоверность различий между группами детей 3-7 лет и старше 7 лет.

 

 

Наиболее существенные изменения в структуре фаций были выявлены у детей старшей возрастной группы. Так, количество объектов (N) в ободковой зоне с возрастом достоверно уменьшалось. Если у детей до 3 лет среднее число объектов составляло 4,23, то у мальчиков старше 7 лет этот показатель снижался до 1,48, т.е. на 65 % (р1<0,01). Средний размер объектов (As) достоверно увеличивался по сравнению с таковым в группе мальчиков дошкольного возраста (р2<0,001). Энтропия ободка уменьшалась в старшей возрастной группе по сравнению с детьми до 3 лет на 85 % (p1<0,001), а по сравнению с мальчиками 3-7 лет – на 79 % (p2<0,001). Единственным параметром промежуточной зоны фации, изменяющимся в возрастном аспекте, была энтропия, достоверно уменьшающаяся как у детей 3-7 лет (p1<0,001), так и у детей старшей возрастной группы по сравнению с мальчиками до 3 лет (p1<0,001).

Площадь центральной зоны фаций слюнной жидкости детей старше 7 лет была меньшей, чем у детей раннего и дошкольного возраста (соответственно p1<0,001, p2<0,001) и содержала линейные кристаллы большего размера, чем в группах детей раннего и дошкольного возраста (p1<0,001, p2<0,001). Так, у детей школьного возраста средний размер объектов центральной зоны в 4 раза превышал аналогичный показатель у детей до 3 лет (р1<0,001) и в 2,8 раза – в группе дошкольников (p2<0,001). У мальчиков дошкольного и школьного возраста количество объектов центральной зоны фации было меньшим по сравнению с мальчиками раннего возраста (р1<0,02, р1<0,001 соответственно), однако не было достоверных различий данного показателя в группах детей дошкольного возраста и школьников (р2>0,1). У мальчиков дошкольного возраста и школьников энтропия центральной зоны снижалась по сравнению с мальчиками раннего возраста (р1<0,001 и р1<0,02 соответственно). Наконец, с возрастом увеличивалась площадь, занимаемая объектами центральной зоны фации (р1<0,02).

Заключение

Таким образом, при изучении фаций, полученных методом клиновидной дегидратации слюнной жидкости мальчиков, выявлены особенности структурообразования в трех возрастных группах. Применение компьютерного имидж-анализа позволило установить не только качественные, но и наиболее значимые количественные различия параметров фаций в разных возрастных группах. Эти результаты послужат основой для формирования качественной контрольной группы детей при использовании данного метода исследования в педиатрической практике.

 


Библиографическая ссылка

Брилль Г.Е., Раскина Е.Е., Постнов Д.Э., Львов Н.И. ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРООБРАЗОВАНИЯ СЛЮННОЙ ЖИДКОСТИ ЗДОРОВЫХ МАЛЬЧИКОВ // Международный журнал экспериментального образования. – 2015. – № 9. – С. 95-98;
URL: http://expeducation.ru/ru/article/view?id=8226 (дата обращения: 03.12.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074