Доказано, что монооксид азота (NO) способен оказывать модулирующее влияние на активность многих нейромедиаторных систем головного мозга, в том числе, ГАМК-ергической. Выявлена способность NO потенцировать активность ГАМК-ергической системы за счет блокады ГАМК-трансаминазы и вызывать, таким образом, увеличение концентрации ГАМК [2]. Есть данные о солокализации NO-синтазы с гамма-аминомасляной кислотой (ГАМК) в части окончаний первичных афферентов и нейронов желатинозной субстанции спинного мозга, что предполагает участие NO совместно с ГАМК в процессах пресинаптического и постсинаптического торможения активности спинальных интернейронов [4, 5].
Цель исследования – изучение влияния блокады nNOs на миорелаксирующее действие центрального миорелаксанта, агониста ГАМКБ-рецепторов баклофена в тесте RotaRod.
Материалы и методы. Эксперименты выполнены на белых нелинейных крысах самцах (180–200 г), содержавшихся в стандартных условиях вивария. Для изучения влияния блокады nNOs на миорелаксирующее действие баклофена выполняли тест «удержания на вращающемся барабане» [1] с использованием аппаратно-программного комплекса «RotaRod» (ООО «Нейроботикс», Москва, Россия). За 24 часа до проведения теста животных обучали навыку удержания на вращающемся барабане путем нескольких посадок на барабан, при падении с которого или попытках спуститься они получали болевое раздражение через электродную сетку в качестве мотивационного стимула (3,5 мА). Скорость вращения барабана 25 оборотов/мин. Регистрировали время удержания животного на вращающемся барабане (с). Блокатор nNOs 7-нитроиндазол (7-NI) использовали в экспериментальной эффективной дозе 30 мг/кг [3]. Баклофен использовали в трех эмпирически подобранных дозах: 1,25 мг/кг, в которой он оказывает слабое миорелаксирующее действие, 2,5 мг/кг – умеренное и 5 мг/кг – выраженное. 7-NI разводили в ДМСО и вводили животным в объеме 0,1 мл/100 г однократно внутрибрюшинно. Баклофен в дистиллированной воде вводили животным также в объеме 0,1 мл/100 г однократно внутрибрюшинно через 15 мин после введения 7-NI, за 30 мин до тестирования. Статистическая обработка результатов: ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Ньюмена-Кейлса.
Результаты и обсуждение. В тесте RotaRod баклофен оказывал дозозависимое миорелаксирующее действие. Так в дозе 1,25 мг/кг он оказывал относительно слабое миорелаксирующее действие, которое выражалось в уменьшении времени удержания животных на барабане в 1,4 раза (р < 0,05) по сравнению с показателем контрольных крыс. С увеличением доз баклофена до 2,5 и 5 мг/кг, время удержания животных на барабане сокращалось в 1,7 (р < 0,05) и 4,7 (р<0,001) раза соответственно, что говорит о нарастании выраженности данного эффекта баклофена в более высоких дозах. Блокатор nNOs 7-NI проявил в этом тесте собственное миорелаксирующее действие – на фоне его введения время удержания животных на барабане уменьшалось в 2,9 раза (р < 0,001) по срвнению с показателем контрольных животных. Сравнение выраженности миорелаксирующего действия баклофена на фоне введения 7-NI и без, в соответствующих дозах, показало, что выраженность миорелаксирующего эффекта при совместном введении изучаемых соединений возрасла в 1,7 (р < 0,05), 2,42 (р < 0,01) и 6 (р < 0,001) раз соответственно при использовании баклофена в дозах 1,25, 2,5 и 5 мг/кг. Полученные данные указывают на то, что в условиях блокады nNOs выраженность миорелаксирующего действия ГАМКБ-миметика баклофена возрастает, что может быть следствием регуляторного (предположительно, угнетающего), влияния нитрергической нейропередачи на ГАМКБ-ергическую, либо результатом фармакодинамического взаимодействия изучаемых соединений – баклофена и 7-NI. Возможно, речь идет о суммации или взаимном потенцировании эффектов данных соединений.
Содержание отдельных представителей фосфолипидов в больших полушариях головного мозга крыс при хронической интоксикации ДХЭ (M ± m)
|
Исследуемый показатель |
Группы животных |
|||
|
1-я группа, (n = 16) |
2-я группа, (n = 16) |
3-я группа, (n = 16) |
||
|
Суммарные фосфолипиды, мкг Р на г влажной ткани |
2167,5 ± 26,95 |
2006,7 ± 69,45* |
1785,1 ± 29,0*^ |
|
|
Фракции ФЛ |
||||
|
ЛФХ |
мкг Р на г влажной ткани |
54,4 ± 4,3 |
63,3 ± 4,29 |
70,2 ± 4,93 |
|
в % от липидного фосфора |
2,52 ± 0,21 |
3,14 ± 0,13* |
3,93 ± 0,26*^ |
|
|
ФХ |
мкг Р на г влажной ткани |
944,04 ± 28,7 |
809,9 ± 36,3 |
779,66 ± 25,26 |
|
в % от липидного фосфора |
43,53 ± 1,05 |
40,33 ± 1,06 |
43,7 ± 1,3 |
|
|
ФЭ |
мкг Р на г влажной ткани |
622,78 ± 14,7 |
484,46 ± 19,9 |
452,15 ± 16,29 |
|
в % от липидного фосфора |
28,72 ± 0,49 |
24,13 ± 0,51* |
25,35 ± 0,89* |
|
|
ФС |
мкг Р на г влажной ткани |
218,85 ± 11,9 |
288,3 ± 12,23 |
167,3 ± 11,87 |
|
в % от липидного фосфора |
10,14 ± 0,64 |
14,38 ± 0,41* |
9,36 ± 0,62^ |
|
|
СМ |
мкг Р на г влажной ткани |
168,03 ± 11,17 |
180,13 ± 8,47 |
168,38 ± 7,4 |
|
в % от липидного фосфора |
7,74 ± 0,49 |
9,0 ± 0,37 |
9,44 ± 0,41* |
|
|
МФИ |
мкг Р на г влажной ткани |
118,13 ± 6,56 |
130,06 ± 8,6 |
89,76 ± 7,63 |
|
в % от липидного фосфора |
5,49 ± 0,29 |
6,5 ± 0,4 |
5,02 ± 0,4^ |
|
|
ФК |
мкг Р на г влажной ткани |
40,93 ± 2,63 |
50,55 ± 3,94 |
57,64 ± 5,4 |
|
в % от липидного фосфора |
1,89 ± 0,11 |
2,52 ± 0,18* |
3,22 ± 0,28* |
|
|
Коэффициент ЛФХ/ФХ, усл. ед. |
0,059 ± 0,0054 |
0,078 ± 0,003* |
0,091 ± 0,007* |
|
|
Коэффициент ФХ/СМ, усл. ед. |
5,84 ± 0,5 |
4,57 ± 0,3* |
4,73 ± 0,33 |
|
|
Коэффициент ФЭ/ФС, усл. ед. |
2,92 ± 0,2 |
1,69 ± 0,062* |
2,8 ± 0,22^ |
|
|
Коэффициент ФХ/ФК, усл. ед. |
23,54 ± 1,24 |
16,7 ± 1,44* |
14,35 ± 1,3* |
|
|
Коэффициент ФЭ + ФС/ФХ + СМ, усл. ед. |
0,76 ± 0,066 |
0,78 ± 0,022 |
0,66 ± 0,029*^ |
|
Примечания: * – достоверно (p < 0,05) по сравнению с первой (контрольной) группой в процентном соотношении от липидного фосфора;
^ – достоверно (p < 0,05) 3 – группы по сравнению со 2-й группой в процентном соотношении от липидного фосфора.
Заключение. Дозозависимое мирелаксирующее действие ГАМКБ-миметика баклофена статистически значимо возрастает в условиях блокады nNOs с использованием 7-NI, что может быть следствием регуляторного влияния NO-нейропередачи на ГАМКБ-ергическую, либо результатом фармакодинамического взаимодействия баклофена и 7-NI.