В условиях высокого антропогенного загрязнения окружающей среды, а также роста иммунодефицита у населения, резко обострилась проблема пищевых инфекций человека и животных. В 80-х гг. XX столетия в пятерку наиболее опасных пищевых бактериальных инфекций вошел листериоз [12]. Алиментарный путь передачи возбудителя, эпидемический характер заболевания, полиморфизм клинических проявлений, тяжесть течения, а также высокий уровень летальности (24–40 %) явились основанием для разработки мер профилактики, связанных, в первую очередь, с контролем безопасности пищевых продук-
тов [14, 22].
В настоящее время не вызывает сомнение факт, что готовая продукция пищевой индустрии, играет ведущую роль в возникновении и распространении листериозных инфекций. Так, спорадические случаи и эпидемические вспышки последнего десятилетия, прежде всего, связывают с употреблением готовых молочных, мясных, рыбных продуктов, подвергшихся соответствующей обработке [5, 2, 14, ,18, 22, 16]. Многочисленные литературные источники сообщают, что L. monocytogenes обнаруживается в широком спектре пищевых продуктов и были выявлены, по крайней мере, из 30 видов продукции растительного и животного происхождения [15, 10]. В настоящее время в литературе доказана и широко освещена ведущая роль в распространении листериозной инфекции таких пищевых продуктов как молоко, сыры, сливочное масло, колбасы, мясные полуфабрикаты, салаты [ 19, 22, 11].
Значение пищевого пути передачи листериозной инфекции хорошо иллюстрируют данные Центра по контролю и профилактике заболеваний США [7], показавшие, что у 64 % больных листериозом в холодильнике был найден хотя бы один продукт, контаминированный листериями. Например, из 3063 образцов готовой к употреблению пищи во Флориде (США), 91 (2,97 %) образец оказался положительным на присутствие L. monocytogenes [24]. В Сингапуре с 1999 по 2000 год, зарегистрировано 58 (1,4 %) случаев листериоза с пищевым путем заражения. Из 3000 протестированных продуктов, 1,3 % оказались контаминированы листериями [8].
Но, в литературе представлены, в основном, эпидемиологические данные, которые не дают возможности определить доминирующую роль того или иного продукта, как субстрата, в распространении инфекции. Кроме того, не ясны механизмы регуляции численности патогенных бактерий, контаминирующих пищевые продукты, а также изменчивости их биологических свойств, в том числе, вирулентных, что возможно исследовать только экспериментальным путем.
Рассматривая пищевые продукты, как экологическую нишу, занимаемую листериями, как правило, основное внимание исследователей уделяется изучению динамики численности патогенных бактерий под влиянием определенных абиотических факторов, используя математическое моделирование данных параметров в зараженных пищевых субстратах [6].
Зарубежные и отечественные данные свидетельствуют об исключительно широких адаптивных способностях L. monocytogenes, обитающих в объектах внешней среды, таких как почва, вода, растения и т.д.) [4, 23]. Описана изменчивость биологических свойств внеорганизменных популяций листерий, включая вирулентность, при их обитании в почве и воде [4, 17]. Очевидно, что на процессы размножения и биологические свойства L. monocytogenes, контаминирующих пищевые продукты, также оказывают влияние такие абиотические факторы как, температура, длительность хранения, вид продукта, упаковка в вакуум и т.д.
Температура является важнейшим фактором окружающей среды, запускающим процесс перестройки обмена веществ в бактериальной клетке, влияющим на скорость ферментативных реакций, характер метаболизма и факторы патогенности листерий. В бактериальных клетках происходят морфологические изменения, являющиеся одним из универсальных механизмов адаптации и обеспечивающие их функциональную полноценность [4].
На сегодняшний день, температурный фактор играет важную роль при хранении пищевых продуктов. Хорошо известно, что L. monocytogenes являются факультативными психрофилами. Высокие термоадаптационные способности позволяют им выживать в температурном диапазоне от 1,7 до 45 °С и поддерживать интенсивность своего метаболизма на необходимом для жизни уровне даже при низких положительных температурах [4, 23]. Это связано с тем, что листерии обладают целым комплексом генетико-биохимических механизмов, позволяющих данным бактериям адаптироваться к изменяющимся температурным условиям, что способствует выживанию популяции во многих объектах окружающей среды. Одним из механизмов термоадаптации, является индукция и репрессия генов, действующих на изоферментном уровне, регулирующая запуск синтеза «холодовых» и «тепловых» изоферментов. При этом установлено, что количество «холодовых» изоферментов у листерий достоверно выше, чем количество «тепловых» [4].
Тем не менее, температурный фактор нельзя отделять от других параметров среды обитания микроба, так как по существу, адаптация относится ко всему комплексу условий, в которых существует популяция микроорганизмов. L. monocytogenes способны осваивать разные экологические ниши, используя для существования различные субстраты (вода, почва, растения, пищевые продукты). Состав этих сред оказывает влияние на изменение их биологических свойств. Помимо абиотических, на биологию возбудителя оказывают влияние и биотические факторы среды, так как листерии входят в состав биоценозов с сапрофитными микроорганизмами, контаминирующими пищевые продукты. Известно, что в почвенных и водных биоценозах регуляция численности листерий в микробных сообществах может осуществляться посредством экзогенных метаболитов [3]. В отношении пищевых продуктов такого рода исследования не проводились.
Важнейшим механизмом адаптации L. monocytogenes является их способность к существованию и размножению в составе биопленок, образуемых на твердых поверхностях и контактирующих с пищевым сырьем на производстве, что способствует их распространению. Бактерии в составе биопленки фенотипически отличаются от планктонных форм. Они медленнее растут, вероятно, из-за меньшей обеспеченности питанием и кислородом, что приводит к снижению уровня метболизма [21]. Установлено, что клетки L. monocytogenes входящие в биопленку, более устойчивы к воздействию дезинфектантов, применяемых в пищевой индустрии, таким как хлориндиоксид, пероксиды, йодофор, нейтрализующие аммонийные соединения
и др. [20].
В составе биопленок листерии контактируют с сапрофитной микрофлорой, обсеменяющей пищевые продукты, что оказывает влияние на биологические свойства патогенов. Так, совместное культивирование L. monocytogenes с сопутствующей микрофлорой мясных продуктов показало, что метаболиты и антимикробные агенты Enterococcus durans, Lactococcus lactis ssp. lactis и Staphylococcus sciuri при температурах 4 и 37 °С ингибировали скорость адсорбции и образование биопленок листериями [13, 25].
Только в единичных работах встречаются сообщения об изменении патогенных свойств (усиление адгезии с клетками аденокарциномы человека (НТ-29)) L. monocytogenes, обитающих на пищевых продуктах (молоко, копченый лосось) [9, 17]. При этом исследования изменения вирулентности проводились только на отдельных видах продуктов или под воздействием какого-то опеределенного фактора, чаще всего температуры или рН [1].
Таким образом, анализ литературных источников показыает, что проблема пищевого листериоза остается актуальной, о чем свидетельствует увеличение вспышек и спорадических случаев в последние десятилетия. При этом основными факторами передачи L. monocytogenes являются пищевые продукты, первостепенное значение из которых, по данным литературы, играют молочные, мясные и рыбные изделия. Но эпидемиологические исследования не дают ответа на вопрос, какие продукты предпочтительнее для листерий в качестве питательного субстрата и как меняются их биологические и патогенные свойства в зависимости от вида контаминируемого продукта и условий его хранения. Рядом авторов доказано влияние абиотических факторов среды обитания на изменение биологии и патогенного потенциала листерий, занимающих различные экологические ниши (почва, вода, простейшие). Вопросы изменчивости L. monocytogenes, контаминирующих пищевые продукты по-прежнему остаются малоизученными. Показано, что воздействие некоторых абиотических факторов вызывает адаптационные изменения, приводящие к образованию биопленок и некультивируемых клеток L. monocytogenes. Вероятно, что в проявлении данных стратегий существования определенную роль играют и биотические взаимодействия. Однако, характер взаимодействий возбудителя, ассоциированного с микрофлорой пищевых продуктов, изучен недостаточно и односторонне.
Комплексный подход к изучению влияния факторов среды (абиотических и биотических) на размножение и биологические свойства листерий, контаминирующих пищевые продукты, позволит выделить наиболее значимые из них и показать механизмы, способствующие ускорению размножения L. monocytogenes и усилению их вирулентных свойств.