При злокачественном росте установлены недостаточность Т-системы иммунитета, нарушения функции регуляторных клеток (клеток-супрессоров, вспомогательных клеток), нарушения функции эффекторных (киллерных) клеток. Показано, что степень нарушения иммунной системы тесно связана с прогнозом лечения заболевания и влияет на результат лечения. Определяющая роль иммунологического статуса в течении злокачественных заболеваний, является в настоящее время общепринятым представлением. Выявлено значительное ослабление клеток опосредованного и гуморального иммунитета у онкологических больных, что проявляется в уменьшении количества Т-лимфоцитов в периферической крови, снижении их функциональнойактивности, а также в появлении факторов, вызывающих блокирование эффекторных Т-клеток [1, 2, 8].
У больных злокачественными опухолями имеет место дисбаланс популяций лимфоцитов и субпопуляций Т-клеток и макрофагов, снижение ответа на специфические и неспецифические митогены, падение уровня тимического сывороточного фактора, а также изменение реакции лимфоцитов на иммуномодуляторы и снижение естественной резистентности активности натуральных киллеров (NК-активности).Изучение иммунного статуса, отражающего весьма сложные и многообразные взаимоотношения организма и опухоли у больных с гинекологической патологией, приобретает всё большее значение. Значительные нарушения Т-системы иммунитета, выражающиеся в относительной и абсолютной Т-лимфопении, угнетении реакции бластнойтрансформации, снижении способности к активному розеткообразованию и положительных реакций гиперчувствительности замедленного типа, отмечены у большинства больных I, II, и III стадий заболевания и с рецидивами опухоли [3-7, 9, 11].Кроме того, показатели иммунной системы до начала противоопухолевой терапии представляют интерес как прогностические критерии эффективности лечения и сроков жизни больных.
Целью данной работы является изучение иммунной системы у больных раком вульвы в состоянии ремиссии и с наличием рецидива заболевания и их сравнительная характеристика.
Материалы и методы исследования
Изучение состояния иммунной системы нами было проведено у больных раком вульвы III стадии в возрасте 45-78 лет: у 45 больных, вошедших
в III клиническую группу (состояние ремиссии) после лечения, и у 36 с рецидивами, появившимися после окончания лечения. Контролем служили результаты обследования 30 практически здоровых женщин сравнимого возраста.
Состояние Т- и В-клеток изучали в ряде количественных и функциональных тестов. Общее содержание Т- и В-лимфоцитов определяли с помощью проточного цитофлюориметра. Функциональную активность Т-лимфоцитов оценивали в реакции бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ), оценивали спонтанную бласттрансформацию, функциональную активность В-клеток изучали в РБТЛ с ЛПС. Состояние NK-клеточного звена оценивали по содержанию в крови больших гранулярных лимфоцитов (БГЛ), которое подсчитывали в мазках крови, окрашенных по Паппенгейму. Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли по измерению оптической плотности сыворотки после инкубации с 3,5 % ПЭГом. Результаты клеточных тестов выражали в процентных и абсолютных (х109/л) значениях, ЦИК – в усл.ед. оптической плотности [7, 8, 10]. Для обработки полученных результатов применяли параметрические и непараметрические методы: критерий Вилкоксона-Манна-Уитни, t-критерий Стьюдента.
Результаты исследования
и их обсуждение
Результаты изучения исходных показателей иммунного статуса больных раком вульвы с III клинической группой и с наличием рецидива после окончания лечения представлены в таблицах 1 и 2 в относительных величинах (%) и в абсолютных значениях к числу лейкоцитов (х109/л).
Таблица 1
Сравнительная характеристика иммунного статуса у больныхIII клинической группы и больных с рецидивами рака вульвы (%)
|
Показатели |
Группы больных |
Здоровые женщины |
|
|
III кл.группа |
рецидивы |
||
|
лимфоциты |
28,4±1,4 |
21,2±1,7* |
31,5±3,2 |
|
моноциты |
5,0±0,06 |
3,9±0,03* |
5,6±0,6 |
|
Т-лимф. (СD2+) |
56,8±2,22 |
49,8±2,5* |
65,0±3,1 |
|
РБТЛ(ФГА) |
37,4±1,38 |
28,5±1,6* |
52,2±2,4 |
|
РБТЛ(ЛПС) |
38,1±1,53 |
30,7±2,0* |
50,3±3,2 |
|
РБТЛ(Спонт) |
10,59±0,57 |
16,5±0,85 |
11,01±0,12 |
|
NК (БГЛ) |
13,0±1,2 |
8,9±0,9* |
13,0±3,1 |
|
ПМТМ |
50,2±2,8 |
41,2±1,6* |
59,0±3,3 |
|
ЦИК(у.е.) |
31,2±2,1 |
45,8±3,1* |
25,0±3,3 |
Примечание.* – статистически достоверные отличия между группами (р<0,05).
Таблица 2
Сравнительная характеристика иммунного статуса у больныхIII клинической группы и больных с рецидивами рака вульвы (х109/л)
|
Показатели |
Группы больных |
Здоровые женщины |
|
|
III кл.группа |
рецидивы |
||
|
лимфоциты |
1,31±0,03 |
0,91±0,04* |
1,89±0,3 |
|
моноциты |
0,27±0,02 |
0,16±0,02* |
0,34±0,09 |
|
Т-лимф. СD2+) |
0,74±0,05 |
0,45±0,05* |
1,2±0,07 |
|
РБТЛ(ФГА) |
0,49±0,03 |
0,27±0,04* |
0,89±0,04 |
|
РБТЛ(ЛПС) |
0,50±0,04 |
0,28±0,03* |
0,86±0,04 |
|
РБТЛ(Спонт) |
0,14 ±0,02 |
0,15 ±0,01* |
0,13 ±0,03 |
|
NК (БГЛ) |
0,17±0,01 |
0,08±0,004 |
0,24±0,03 |
|
ПМТМ |
0,14±0,02 |
0,07±0,01* |
1,12±0,03 |
Примечание.* – статистически достоверные отличия между группами (р<0,05).
Как свидетельствуют данные, представленные в таблицах 1 и 2, у пациенток
III клинической группы и больных с рецидивами имеются существенные различия исследованных параметров иммунного статуса. Содержание лимфоцитов, в частности, Т-ряда в крови больных с рецидивами исходно было достоверно ниже как в процентных, так и в абсолютных значениях. Функциональная активность Т- и В-лимфоцитов в РБТЛ также была статистически достоверно ниже при рецидивах.
Митогениндуцированная пролиферативная активность Т и В-лимфоцитов, оцениваемая по уровням ФГА и ЛПС-стимулированных клеток, в III клинической группе была в среднем на 15 % ниже, чем у здоровых женщин, но статистически достоверно выше, чем у больных с рецидивами. Противоположные данные отмечены по показателю спонтанной РБТЛ, который в группе рецидивных больных был выше, чем у больных III клинической группы. Вследствие этого, индексы стимуляции у больных с рецидивами оказались в 2 раза ниже, чем у больных III клинической группы (1,75 и 3,55 для ФГА; 1,86 и 3,6 для ЛПС, соответственно).У больных с рецидивами рака вульвы наблюдалось снижение уровня моноцитов до 3,9±0,03 % и их функциональной активности на 18 % по сравнению с больными, вышедшими в ремиссию.
Вместе с тем, обращает на себя внимание уровень БГЛ, обогащенных киллерными клетками: NK у пациенток в III клинической группе был равен 13,0±1,2 и 0,17±0,01х109/л, а у больных с рецидивами, соответственно, 8,9±0,9 и 0,08±0,004 х109/л (р<0,05).Количество циркулирующих иммунных комплексов в группе больных с рецидивами значительно выше и равно 45,8±3,1 у.е. против показателя у пациенток III клинической группы – 31,2±2,1 (р<0,05).Следовательно, состояние иммунной системы до лечения в немалой степени определяет неблагоприятный исход (либо эффективность терапии), а именно: достоверно низкий уровень NK, реверсия в соотношениях регуляторных клеток на фоне высокого уровня блокирующих факторов. По-видимому, следует думать о нарушении в саморегуляции иммунокомпетентных клеток периферической крови больных раком вульвы, т.к. циркулирующие иммунные комплексы изменяют метаболизм лимфоидных клеток и их функции, в том числе и киллерную активность. Для подтверждения влияния иммунной системы на течение опухолевого процесса, ретроспективному анализу подвергнуты показатели лечения больных
в III стадии с последующими различными сроками жизни этих больных.
В табл. 3 представлены показатели иммунной системы до противоопухолевого лечения больных, проживших не более 2 лет (27 больных) и более 3 лет (24 больных). Как свидетельствуют данные анализа нарушения в системе иммунитета у больных аналогичны тем, что установлены при сравнении больных, вошедших в III клиническую группу и в группу с рециди-
вами.
Таблица 3
Сравнительная характеристика иммунного статуса у больныхраком вульвы с различными сроками жизни
|
Показатели |
Продолжительность жизни |
|||
|
до 2 лет |
более 3 лет |
|||
|
% |
х109/л |
% |
х109/л |
|
|
лимфоциты |
20,1±3,1 |
0,95±0,05 |
30,3±3,1* |
1,25±0,04* |
|
моноциты |
4,0±0,3 |
0,18±0,01 |
5,1±0,5* |
0,21±0,02* |
|
Т-лимф. СD2+) |
49,5±2,6 |
0,47±0,04 |
58,3±3,4* |
0,72±0,07* |
|
Т-актив. лимф. |
20,8±2,2 |
0,23±0,02 |
26,1±1,8* |
0,32±0,02* |
|
РБТЛ (ФГА) |
35,4±2,1 |
0,33±0,03 |
38,2±3,1* |
0,47±0,03* |
|
РБТЛ (ЛПС) |
31,0±3,2 |
0,29±0,02 |
37,0±3,4* |
0,46±0,04* |
|
РБТЛ (Спонт) |
15,5±0,08 |
0,14±0,07 |
10,3±1,6* |
0,19±0,03* |
|
NК (БГЛ) |
10,0±1,8 |
0,04±0,009 |
13,2±1,5* |
0,16±0,01* |
|
ПМТМ |
44,2±3,1 |
0,08±0,001 |
53,0±3,1* |
0,11±0,02* |
|
ЦИК (у.е.) |
43,0±3,2 |
- |
33,0±1,3* |
- |
Примечание. * – статистически достоверные отличия между группами (р<0,05).
Однако обращают на себя внимание в первой группе больных низкие уровни как Т-общих, так и активных лимфоцитов (р<0,01), в то время как во второй группе количество Т-общих и активнорецепторных лимфоцитов почти не изменялось по отношению к показателям у здоровых женщин.Кроме того, для прогноза выживаемости немаловажное значение имеют активность моноцитарно-макрофагального звена иммунитета и количество естественных киллерных клеток. Во второй группе женщин указанные фоновые исходные данные до лечения были достоверно выше по сравнению с таковыми в первой группе женщин, проживших менее 2-х лет.
Следовательно, прогностический профиль иммунных показателей периферической крови больных раком вульвы отражает нарушения в регуляции функциональной активности всех субсистем иммунитета.
Заключение
Таким образом, развитие рецидивов рака вульвы сопровождается статистически значимым угнетением количественных и функциональных иммунологических параметров, характеризующих моноцитарно-макрофагальное, Т-клеточное и В-клеточное звенья иммунной системы. Следовательно, состояние иммунной системы больных раком вульвы до лечения в немалой степени определяет исход терапии – неблагоприятный или эффективный, а именно достоверно низкие уровни иммунно-регуляторных клеток, реверсии в соотношении их на фоне высокого уровня блокирующих факторов, которые изменяют метаболизм лимфоидных клеток и их функции, в том числе и киллерную активность.