Однако, в фазы молозивного и молочного питания у поросят до сих пор не определено состояние перекисного окисления липидов (ПОЛ) плазмы и тромбоцитов, активность антиокислительных ферментов кровяных пластинок, обуславливающих уровень активности тромбоцитов. Остается невыясненной онтогенетическая динамика агрегационной функции тромбоцитов под влиянием различных индукторов и их сочетаний и степень морфологической активности тромбоцитов в просвете сосудов у поросят. В этой связи была поставлена цель настоящего исследования: определить динамику параметров тромбоцитарных функций у здоровых поросят в течение фаз молозивного и молочного питания.
В исследование включены здоровые поросята: 27 новорожденных поросят и 24 поросенка 20 суточного возраста. Внутритромбоцитарное ПОЛ оценивали по концентрации базального уровня малонового диальдегида (МДА) в реакции восстановления тиобарбитуровой кислоты, в модификации и по уровню ацилгидроперекисей (АГП). Производили подсчет количества тромбоцитов в капиллярной крови в камере Горяева. Продукты лабилизации тромбоцитарных фосфолипидов - активаторов свертывания (Ф3 -тромбоцитов) оценивали по методу Е.Д. Еремина с вычислением индекса тромбоцитарной активности. Агрегация тромбоцитов (АТ) исследовалась визуальным микрометодом по Шитикова А.С. (1999) с использованием в качестве индукторов АДФ (0,5х10-4 М.), коллагена (разведение 1:2 основной суспензии), тромбина (0,125 ед/мл.), ристомицина (0,8 мг/мл.), адреналина (5х10-6 М.), а также сочетания АДФ и адреналина, АДФ и коллагена, адреналина и коллагена для моделирования реальных условий кровотока. Внутрисосудистая активность тромбоцитов (ВАТ) определялась визуально с использованием фазовоконтрастного микроскопа по Шитиковой А.С. и соавт.(1997). Статистическая обработка полученных результатов проведена с использованием t-критерия Стьюдента.
Включенные в исследование поросята находились под постоянным наблюдением. Установлено, что оцениваемые общие функциональные и биохимические величины (температура, ЧСС, частота дыхания, содержание в крови лейкоцитов, концентрация белка) у обследуемых поросят во все сроки наблюдения находились в пределах физиологической возрастной нормы.
Активность первичных продуктов ПОЛ-АГП в тромбоцитах здоровых поросят в возрасте 1 суток находился на уровне 2,72±0,04 Д233/109тр., достоверно не меняясь до 3 суток жизни и испытывая достоверное снижение с 4 суток (2,84±0,05 Д233/109тр.). При этом, уровень базального МДА в тромбоцитах в 1 сутки жизни у них составил 0,80±0,04 нмоль/109тр., также достоверно снижаясь на 4 день жизни (0,76±0,09 нмоль/109тр.).
Активность каталазы и СОД в кровяных пластинках здоровых поросят достоверно повышалась с 1 по 5 сутки с 9200,0±12,06 МЕ/109тр. до 10220,0±14,02 МЕ/109тр. и с 1690,0±3,11 МЕ/109тр. до 1750,0±1,90 МЕ/109тр., соответственно.
В молочном периоде у животных отмечено дальнейшее нарастание активности каталазы и СОД (10350,0±10,10 МЕ/109тр. и 1790,0±3,29 МЕ/109тр., соответственно), что обуславливало тенденцию к ослаблению ПОЛ в кровяных пластинках к 20 суткам жизни (базальный МДА 0,65±0,02 нмоль/109тр., АГП 2,56±0,04 Д233/109тр.).
Уровень ИТА в первые двое суток жизни поросят составлял 24,8±0,07%, имея тенденцию к повышению в течение всей фазы новорожденности, что указывало на слабое нарастание уровня продуктов лабилизации тромбоцитарных фосфолипидов - активаторов свертывания крови. У более старших поросят тенденция к нарастанию усиливалась, составляя в 20 суток 25,2±0,03%.
У поросят в суточном возрасте время развития АТ под влиянием коллагена составляло 35,6±0,07с. с последующей тенденцией к ускорению, достигающей уровня достоверности к 3 суткам жизни. Аналогичная динамика АТ у здоровых новорожденных поросят отмечена под влиянием АДФ (в среднем 43,6±0,14с.) и ристомицина (в среднем 46,4±0,12с.). В более поздние сроки развивалась тромбиновая и адреналиновая АТ, также достоверно ускоряясь на 3 сутки жизни, составляя в среднем за первые 5 суток жизни 57,7±0,07с. и 99,5±0,03 с., соответственно. Установленная динамика АТ у новорожденных поросят при изолированном применении индукторов распространялась и на сочетания индукторов, составлявших в среднем: для АДФ+адреналин - 35,4±0,04с., для АДФ+коллаген - 24,8±0,06 с., для адреналин+коллаген - 27,6±0,11с.
Выявленные закономерности подтверждались исследованием ВАТ. Дискоцитов в крови у здоровых новорожденных поросят в первые сутки жизни содержалось 83,1±0,24%, достоверно снижаясь на 3 сутки жизни до 82,5±0,02%. С продолжением снижения до конца фазы новорожденности количество диско-эхиноцитов, сфероцитов, сферо-эхиноцитов и биполярных форм тромбоцитов к 3 суткам достоверно превышало исходный уровень, вследствие чего сумма активных форм тромбоцитов также претерпела достоверные изменения, составляя к концу фазы новорожденности 18,0±0,08%. В крови новорожденных поросят уровни свободноциркулирующих малых и больших агрегатов тромбоцитов начинали достоверно увеличиваться с 3-х суток жизни, составляя в начале фазы новорожденности 2,90±0,01 и 0,11±0,05 на 100 свободно лежащих тромбоцитов и в ее конце 3,17±0,06 и 0,16±0,06 на 100 свободно лежащих тромбоцитов, соответственно. Количество тромбоцитов, вовлеченных в процесс агрегатообразования, у здоровых поросят в начале фазы новорожденности составило 6,6±0,14%, в ее конце 7,3±0,07%. К 20 суточному возрасту у здоровых поросят отмечено дальнейшее достоверное усиление ВАТ (сумма активных форм 19,9±0,02%). Можно думать, что нарастание уровня ВАТ in vivo у поросят в плоть до конца фазы молочного питания, обеспечивает у них оптимальную микроциркуляцию во время адаптации к внеутробной жизни и периоде интенсивного роста с усилением ВАТ под действием средовых влияний, необходимом для адекватного гемостаза, направленного на поддержание гомеостаза в развивающемся организме животного.
Таким образом, в процессе онтогенеза поросят по мере увеличения хронологического возраста повышается активность тромбоцитов, увеличивая содержание их активных форм в кровяном русле, способствуя нарастанию числа циркулирующих агрегатов различных размеров, что имеет большое приспособительное значение для поддержания гомеостаза в условиях нарастания средовых воздействий в ходе онтогенеза.