Актуальность Регенерация печеночной паренхимы является одним из важнейших показателей в хирургической гепатологии, определяя во многом исход оперативных вмешательств (Мовчун А.А., 1999; Муслимов С.А., 2000; Гарбузенко Д.В. и соавт., 2001; Вишневский В.А., 2005; Тимербулатов В.М. и соавт., 2008). В клинической практике обсуждение показаний и противопоказаний к обширным резекциям печени неизбежно связано с вопросом достаточности той части неизмененной паренхимы органа, которой в послеоперационном периоде предстоит обеспечивать печеночную функцию [1.5]. Важным разделом хирургической гепатологии является внедрение и разработка новых способов и методов стимуляции регенераторных процессов в печени [1,2]. Путём различных хирургических вмешательств. Исследования регенерации печени признаются очень актуальными. Этот раздел хирургической гепатологии выделяет различные способы стимуляции регенерации печени. Такие как перевязка печеночной артерии, ветвей воротной вены, резекция печени, гепатофреникопексия и др. методы. P. Mallet – Guy (1954); H. Karon (1974); С.Б. Цирятьева (1991); Д.В. Усов (1993).
Клинические наблюдения и экспериментально-морфологические исследования показывают, что наряду с нарушениями структуры и функции печени в ней возникает ряд процессов компенсаторно-приспособительного характера Д.С. Саркисова (1977) выделяет 4 вида регенерации: молекулярная, обеспечивающая различные уровни обновления молекул; внутриорганоидная, в результате которой происходит нормализация или гипертрофия органоидов клетки; органоидная, необходимая для увеличения числа органоидов и гиперплазии клеточного аппарата. Эти три формы свойственны внутриклеточной регенерации. Четвертую форму составляет клеточная регенерация, в процессе которой происходит клеточное деление. Стимуляция таких процессов, управление ими, могут стать важным моментом в лечении дистрофических поражений печени [4].
Существующие способы регенерации требуют модернизации и поиска новых малоинвазивных путей стимуляции репаративно-регенераторных процессов [3].
Целью настоящего исследования явилось разработка способа стимуляции регенерации печени с использованием малоинвазивных методов и лапороскопических методов исследования.
Материал и методы исследования. Эксперимент проводился на 25 беспородных собаках обоего пола весом от 5 до 20 кг. Все эксперименты проводились с учетом требования «Этического кодекса СМНО ВОЗ по проведению экспериментов с использованием лабораторных животных (1985 г.). Контрольная группа составила 5 животных. Измерение тканевого давления проводилось методом выравнивания жидкостей (A.C. Gyton 1971 г.; Hesse 1971 г.; A. Silberg 1981 г.).
Под общим обезболиванием при помощи воздушно-эфирной смеси. После обработки операционного поля через лапароскоп определяли величину исходного тканевого давления, далее электродом 0,3 см током высокой частоты 8 мА последовательно проводили прижигание по диафрагмальной поверхности печени через 2,0 см с экспозицией 10 сек до снижения величины тканевого давления в стенке органа на 8-10 % от исходного (патент RU № 2198621 от 20.02. 2003). Забор экспериментального материала проводился на 10, 30, 60 сутки с момента операции, количество животных составило 5 в каждой серии. По истечении срока при повторной операции экспериментальный участок печени удалялся. Животное выводились из эксперимента. Для оценки эффективности регенерации печеночной ткани проводилось гистоморфологическое изучение материала по общегистологической методике.
Результаты исследования и обсуждение. В результате проведённого исследования выявлено следующее, так на 10 сутки после проведения лапароскопической электрокоагуляции печени с экспозицией 10 сек током высокой частоты 8 мА отмечено достоверное снижение объёма волокнистых структур до 6,6 ± 0,1 % (таблица) Одновременно проходило увеличение объёмного соотношения количества гепатоцитов до 65,7 ± 1,6 %, с признаками гипертрофии и увеличение II-х и III-х классов. В ходе исследования гисторлогических препаратов также отмечено увеличение накопления гликогена до 79,09 ± 0,6 % по сравнению с контрольной группой. Проведённое гистоморфологическое исследование препаратов печени в указанные сроки говорит об активизации регенераторных процессов в органе.
Сравнительная оценка динамики морфологических и гистохимических изменений в печени при проведении термокоагуляции
|
Элементы стромы и паренхимы печени |
Волокна (%) |
Гепатоциты (%) |
Ацинусы (%) |
Гликоген (%) |
Жировая инфильтрация (%) |
|
Контрольная группа |
11,1 ± 0,3 |
59,2 ± 1,2 |
29,1 ± 0,4 |
76,02 ± 2,21 |
2,49 ± 0,19 |
|
10-е сутки после операции |
6,6 ± 0,1* |
65,7 ± 1,6* |
27,7 ± 0,6* |
79,04 ± 0,6* |
2,01 ± 0,25 |
|
30-е сутки после операции |
4,3 ± 0,4* |
67,2 ± 1,.3* |
27,5 ± 0,3* |
82,03 ± 1,13 |
1,84 ± 0,15 |
|
60-е сутки после операции |
4,1 ± 0,3* |
68,4 ± 1,5* |
27,5 ± 0,2* |
84,11 ± 1,31 |
1,71 ± 0,12 |
|
* При сравнении с контрольной группой р < 0,05 |
|||||
Наибольшие изменений в ходе исследования нами выявлены на 30-е сутки после проведения экспериментального воздействия. Так при изучении гистологических препаратов печени выявлено наибольшее снижение объёма волокнистых структур 4,3 ± 0,4 % по сравнению с контрольной группой 11,1 ± 0,3 %. При этом объём гепатоцитов увеличился до 67,2 ± 1,3 % с высоким содержанием гликогена в их цитоплазме гепатоцитов 82,03 ± 1,13 % по сравнению с контрольной группой. Параллельно отмечалось снижение объёма жировой инфильтрация клеток печени до 1,84 ± 0,15 %, при этом объёмные соотношения ацинусов оставались без изменения 27,5 ± 0,3 %. Таким образом, в ходе проведённого исследования выявлено что на 30 сутки при сравнении с предыдущей группой отмечается наиболее выраженная регенерация характеризующаяся, снижением объёма волокнистых структур и жировой инфильтрации с параллельными увеличением количества гепатоцитов и содержанием в них гликогена.
На 60-е сутки после проведённого эксперимента динамика регенеративных процессов в печени несколько ниже чем в предыдущей группе, что отражено в таблице.
Таким образом, разработанный в ходе исследования способ стимуляции регенерации печени позволяет получить стойкую регенераторную реакцию печени, результатом которой и является достоверное увеличение объема гепатоцитов, с высоким содержанием гликогена в них. Одновременно происходит повышение объёмного числа гепатоцитов II- III класса от общего их числа. Данные изменения происходят на фоне адекватного снижения концентрации элементов стромы и жировой инфильтрации клеток. Применение данного метода в клинике на больных с различными дистрофическими изменениями доказало его высокую клиническую эффективность.