Роль иммунной системы в механизмах старения обсуждается довольно широко. В настоящее время активно развивается иммунная теория старения, которая основана на самых современных научных данных о том, что иммунитет является не только «борцом с инфекциями», но и важнейшей регуляторной системой организма [1-5]. Можно считать взаимосвязь нервной, иммунной и эндокринной систем общепризнанной, а связь процессов старения с состоянием иммунной системы доказанной[6-8]. Поэтому целью данного исследования стало изучение влияния вновь синтезированного вещества МХФ-17 на поведенческие реакции старых крыс.
Материал и методы исследования. Эксперимент проведен на 20 старых крысах самцах массой 340–370 г., содержавшихся в стандартных условиях вивария на обычном пищевом рационе. Проведены 2 серии эксперимента: 1 серия – старые крысы, подвергавшиеся иммобилизационному стрессу; 2 серия – старые крысы со стрессом, леченые полиоксидонием. Иммобилизационный стресс моделировали путем помещения крыс в пластиковую коробку, ограничивающую свободу движений, на 30 минут, в течение 10 дней. Лечение полиоксидонием проводилось после каждого акта стрессирования, препарат вводился внутримышечно, контрольная группа получала эквивалентный объем физиологического раствора NaCl. В каждой серии было по 10 животных. Изучение поведенческих реакций проводилось в тесте «открытого поля». Каждое животное наблюдалось в течение 300 секунд, в качестве поведенческих феноменов регистрировали горизонтальную двигательную активность по количеству пересеченных квадратов, вертикальную активность по числу подъемов на задние лапы с опорой и без опоры, эмоциональный статус по количеству дефекационных болюсов и умываний, исследовательский интерес по количеству актов «обнюхиваний». Исследование проводилось с соблюдением норм и правил проведения экспериментов с участием животных. Полученные в ходе эксперимента данные подвергались статистической обработке при помощи программы SPSS версия 16, STATISTICA версия 7. Количественные показатели представлены в виде М(Со), Ме (25 %–75 %), где М – среднее значение, а Ме – медиана, 95 % ДИ. Для проверки совпадения распределения исследуемых количественных показателей с нормальным в группах был использован критерий согласия Колмогорова-Смирнова. Учитывая, что распределения исследуемых числовых показателей отличались от нормального, значимость различий проверена при помощи W-критерий Уилкоксона в случае зависимых совокупностей, и в случае независимых – U критерий Манна-Уитни. Различия считались значимыми при р ≤ 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение. В первом опытном сеансе (выработке), у стрессированных старых крыс, медиана движений на месте и болюсов составила 18,5 (интерквантильный размах от 17,0 до 21,0), и 3,0 (интерквантильный размах от 2,0 до 4,0) соответственно. Между тем у стрессированных крыс, леченных полиоксидонием, количество актов «движения на месте» и «болюсы» статистически значимо снижалось на 33,9 % (р = 0,002 Z = – 3,137) и 48,1 % (р = 0,028 Z = – 2,192) соответственно. Результаты исследованных поведенческих паттернов дали основание заключить, что под влиянием полиоксидония у крыс снижается тревожность и чувство страха, что свидетельствует о стабилизации эмоционального состояния у стрессированных крыс.
Таблица 1
Основные статистические показатели поведенческих реакций старых крыс,
леченых полиоксидонием в первом опытном сеансе открытого поля
Показатель поведенческого акта |
Старые интактные |
Старые + Полиоксидоний |
Mann-Whitney U-test |
||||
N |
Mе |
25 %–75 % |
N |
Mе |
25 %–75 % |
||
Выработка |
|||||||
Движения на месте |
10 |
18,6 |
17,0–21,0 |
10 |
12,0 |
10,0–16,0 |
0,002* Z = – 3,137 |
Болюсы |
10 |
3,0 |
2,0–4,0 |
10 |
1,0 |
1,0–2,0 |
0,028* Z = – 2,192 |
Примечание: * по Манна-Уитни статистическая значимость по отношению к интактным старым.
Во втором опытном сеансе исследовательские показатели поведенческих актов оставались на уровне интактных крыс. Между тем под влиянием Полиоксидония у старых крыс улучшилась горизонтальная и вертикальная двигательной активность. Так под влиянием полиоксидония количество пересеченных наружных квадратов в сравнении с интактными старыми крысами увеличилось на 15,5 % (р = 0,0015** Z = 3,175). Кроме того увеличилась вертикальная двигательная активность, как то: количество опор на стенку и длительность стоек с опорой в 2 и более раз, что по сравнению с интактными особями носило статистически значимый характер.
Таблица 2
Основные статистические показатели поведенческих реакций старых крыс,
леченых полиоксидонием во втором опытном сеансе открытого поля
Показатель поведенческого акта |
Старые интактные |
Старые + Полиоксидоний |
Mann-Whitney U-test |
||||
N |
Mе |
25 %–75 % |
N |
Mе |
25 %–75 % |
||
Проверка |
|||||||
Наружные квадраты |
10 |
10,8 |
10,0–12,0 |
10 |
17,5 |
15,0–20,0 |
0,0015* Z = 3,175 |
Количество опор на стенку |
10 |
1,0 |
0,0–2,0 |
10 |
2,0 |
2,0–3,0 |
0,002* Z = – 3,137 |
Длительность стоек с опорой |
10 |
2,2 |
0,0–5,0 |
10 |
6,0 |
4,0–6,0 |
0,028* Z = – 2,192 |
Примечание: * по Манна-Уитни статистическая значимость по отношению к интактным старым.
Выводы. Таким образом, следует отметить, что лечение полиоксидонием старых стрессированных крыс оказало существенное влияние на эмоциональное состояние животных, снизив у них тревожность и чувство страха, после перенесенного стресса, в первом опытном сеансе. Во втором опытном сеансе сохранялась динамика улучшения эмоционального состояния животных, что возможно, способствовало повышению двигательной и исследовательской активности у старых крыс.