Scientific journal

International Journal of Experimental Education

ISSN 2618–7159

ИФ РИНЦ = 0,425

Проблема антигенной структуры метапневмовируса (МПВ) помимо большого теоретического значения представляет в настоящее время существенный практический интерес в период массовой вакцинации против метапневмовирусной инфекции (МПВИ) птиц, а также при изучении репликации вакцинных и эпизоотических штаммов вируса в организме и культурах клеток и их распространения среди птиц.

Различия в антигенной структуре и аминокислотной последовательности гена, существующие штаммы МПВ классифицированы на подтипы А, В, С и Д (И.А. Борисова, 2008; J.K.A. Cook, D. Cavanagh, 2002; M.I. Sabara, J.E. Larence, 2002).

На территории РФ установлена циркуляция МПВ птиц подтип А и В (А.С. Пронин и др., 2006).

При изучении случаев заболевания МПВИ птиц в период массовой вакцинации против нее должны быть получены доказательства происхождения выделенных штаммов вируса.

Целью настоящей работы явилось изучение антигенной специфичности (Ag – признак) и степени нейтрализации (An – признак) штаммспецифической антисывороткой к вакцинным штаммам МПВ птиц.

При выполнении работы использовали вакцинные штаммы 8544 подтипа А (G.P. Wilding et. al., 1986) и VC-03 подтипа В (J.P. Picault et. al., 1987) МПВ птиц, культивируемые в клетках Vero. Антигенный характер каждого штамма вируса является специфичным и высокостабильным свойством и не зависит от той чувствительности системы, в которой репродуцируется вирус. Для характеристики Ag – признака по методу W.D.McBride (1959) применили величину К, которая вычисляется по формуле:

,

где D – рабочее разведение сыворотки; V0 – исходная активность вируса; Vt – активность вируса ко времени.

При сравнении Ag – признака штаммов использовали так называемую нормальную величину К (NK). При этом абсолютную величину стандартного штамма, нейтрализованного гомологичной сывороткой, принимали за 100 %, в величину NK изучаемых штаммов выражали в процентах к величине К стандартного штамма. Значения констант скорости нейтрализации (К) свидетельствовали о достоверности полученных результатов (> 2).

Полученные данные, приведенные в табл. 1, показали, что вакцинные штаммы 8544 и VC-03 МПВ птиц нейтрализовались в большей степени за время t = 15 мин контакта при 37°С гомологичной антисывороткой по сравнению с гетерологичной.

Таблица 1

Результаты реакции нейтрализации сыворотками к вакцинным штаммам 8544 и VC-03 МПВ птиц

Примечание. ИН – индекс нейтрализации; К – константа нейтрализации.

Таблица 2

Результаты перекрестных реакций нейтрализации и ИФА вакцинных штаммов специфическими антисыворотками (n=5)

Примечание. ИН – индекс нейтрализации; * – титры антител в обратных величинах.

Степень нейтрализации (An – маркер) изучали по методу S. Gard (1960) в перекрестной реакции нейтрализации и иммуноферментном анализе (ИФА). В опытах использовали штаммспецифические сыворотки в постоянной дозе 4NE.

Результаты, представленные в табл, 2, показали, что вакцинные штаммы 8544 и VC-03 ингибировались в больших логарифмах в присутствии гомологичной штаммспецифической сыворотки, чем гетерологичной.

Степень антигенного родства между штаммами составила 88 и 90 % в ИФА и реакции нейтрализации соответственно по J. Archetti, F.L. Horsfall (1950).

Для идентификации подтипов МПВ птиц И.А.Б орисова (2008); H.M. Hafez (1992) D. Toquin et. al. (1996, 1999) использовали наборы ИФА, изготовленные с использованием антигенов разных подтипов вируса, и показали различную чувствительность, но 100 % специфичность, а в реакции нейтрализации установили перекрестную нейтрализацию штаммов МПВ птиц.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что вакцинные штаммы 8544 и VC-03 различаются по An⁺ и Anˉ маркерам, но оказались близкородственными.