Scientific journal

International Journal of Experimental Education

ISSN 2618–7159

ИФ РИНЦ = 0,425

По данным Всемирной организации здравоохранения, в ближайшие 10 лет, доля фитопрепаратов в объеме лекарственных средств составит около 60 %. Одним из наиболее продуктивных путей получения новых биологически активных веществ является выделение соединений из растений. В связи с этим, в последние годы расширяются исследования дикорастущих растений, широко произрастающих на засоленных и засушливых почвах Республики Казахстан и адаптировавшихся к экстремальным условиям [3].

В настоящее время в медицинской клинической практике используют препараты с миелосупрессивным действием. В частности, все цитостатики, применяющиеся в онкологической практике (в результате чего больной погибает не из-за онкологического заболевания, а от острой миелосупрессии), противотуберкулезные препараты (стрептомицин, тиацетазон, изониазид, Р-аминосалициловая кислота, диметилкарбазин), раствор Шторддарта (продукт перегонки нефти), тринитротолуол, пестициды, особенно хлорорганические препараты, линдан (гамма-гексахлорциклогексан) и ДДТ (дихлордифенилтрихлорэтан) также вызывают тяжелую панцитопению – одновременное уменьшение числа лейкоцитов, тромбоцитов, эритроцитов [1, 2].

Материалы и методы исследования

В работе использовали здоровых половозрелых животных – лабораторных крыс обоего пола, 10-15 нед. возраста, массой тела 210-280 г. До и в период эксперимента контрольные и опытные животные содержались в одинаковых стандартных условиях, на стандартном рационе, по 6 особей в клетке. Забор крови проводили из орбитальной вены крыс, наркотизированных слабым эфирным наркозом в 09.00 часов утра. Анализ крови проводили на гематологическом анализаторе для лабораторных животных «Abacus junior vet» (пр-во Diatron, Дания). Миелосупрессию вызывали внутримышечным введением цитостатика циклофосфамида натрия в дозе 30 мг/кг веса животного. Опытным группам животных соединения вводили в дозе 10 мг/мл (растворитель физиологический раствор), внутримышечно в объеме 0,5 мл ежедневно в течение 3 дней, спустя 3 дня после последнего введения определяли количество клеток в периферической крови. Контрольным животным в таком же объеме и режиме вводили физиологический раствор. Препаратом сравнения являлся пантогематоген.

Таблица 1

Активные соединения полученные путем водного и водно-этилового экстрагирования растений

Соляноколосник прикаспийский – Соляноколосник прикаспийский, несмотря на его распространенность, на территории Средней Азии и Казахстана является сравнительно малоизученным.В частности, практически не изученным является фитохимический состав надземной части соляноколосника прикаспийского. В связи с этим изучение соляноколосника прикаспийского и препаратов на его основе представляет значительный научный и практический интерес. Целью исследования являлось изучение фитохимического состава надземной части соляноколосника прикаспийского. Объектом исследования является надземная часть соляноколосника прикаспийского (Halostachys caspica) семейства Маревые (Chenopodiaceae). Выбор объекта связан со значительными запасами сырья на территории Алматинской области; высоким содержанием водорастворимых БАВ, в частности солей алкалоидов (до 0,61 % (галостахин) кустарник или дерево высотой до 3,5 м. Стебель сильно ветвистый, почти безлистный; однолетние побеги сизые, сочные, цилиндрические, членистые, голые. Листья чешуевидные, на концах треугольные. Соцветие колосовидное, супротивное. Цветки сидят по 3 в пазухах листочков. Семена голые, продолговато–яйцевидные.Цветет в июле-сентябре. Растет на мокрых солончаках, большей частью в долинах рек и по морским побережьям. Сырьем является трава (стебли, листья, цветки).В растении обнаружены алкалоиды (галостахин), антрахиноны – хризофанол (хризофановая кислота), зола.

Сведа мелколистная Семейство маревые – Chenopodiaceae Vent. Сведа (Suaeda) – род галофильных растений семейства Маревых, который включает в себя около 100 видов по всему земному шару, кроме арктической зоны. на бывшей территории СССР описано 25 видов, из них 17 в Казахстане. Виды рода представляют собой одно- или многолетние травы, полукустарнички и кустарнички, большей частью с очередными узкими сочными листьями с мелкими цветками. Растут обычно массами по засоленным местам, морским побережьям, берегам соленых водоемов. Сведа мелколистная встречается на Кавказе, Армении, в Иране, Турции, Афганистане, Западном Китае и Средней Азии и является одним из наиболее распространенных видов этого рода. Это растение представляет собой полукустарник 30–75 см высотой, сильно ветвистый, с пепельно-серыми, листья 3–10 мм длинной, мясистые, сизые, голые, вальковатые, тупые, сужены в короткий черешочек; семена горизонтальные, с примесью вертикальных и косых, 0,75–1,2 мм длинной, выпуклые, черные, блестящие, со слабозаметным точечным рисунком .

Результаты исследования и их обсуждение

Уже на 1-е сутки после введения можно было регистрировать тяжелую иммунодепрессию с поражением как лейкоцитарных клеток, так и красных кровяных клеток. За контроль по уровню поражения кроветворных пулов был взят 3-й день после введения иммунодепрессанта. Проведя анализ гемограммы крови было выявлено, что в большой степени пострадал лейкоцитарный пул. Общий лейкоцитрный показатель с уровня интактных животных (9,15±1,36)·109/L крови упал до (2,371±0,16)·109/L в 3,86 раза (Р≤0,05). В лейкограмме снизились обсолютные и относительные значения агранулоцитарных и гранулацитарных лейкоцитов. Среди агранулоцитов относительные значения лимфоцитов со значения (5,46±0,18)·109/L крови упали в 3,41 раза до значения (1,60±0,2)·109/L тогда как относительные значения со значения интактных животных (68,03±12,3) % крови упали лишь в 1,44 раза до (47,2±1,8) % крови. Аналогичная тенденция наблюдалась и в отношении других субпопуляций клеток.

Абсолютные значения падали более чем в 2 раза, а относительные значения снижались менее чем в 1,5 раза. Например, абсолютные значения моноцитарных клеток со значения (0,5±0,02)·109/L крови снизилось до значения (0,12± 0,10) ·109/L крови, т.е. в 4,17 раза (р≤0,05), тогда как относительное значение (6,28±1,24) % упало лишь до (4,9±1,3) %, что составило лишь 1,28-кратную разницу в значениях. Гранулоцитарные клетки со значения (3,64±1,22)·109/L упали до (0,65±0,3) ·109/L, т.е. в 5,6 раза(р≤0,01). А относительное значение гранулоцитов со значения (40,0±8,36). % упало в 1,52 раза, достигнув значения (26,18±4,5) % [4,5].

То, что абсолютные значения снижаются значительнее чем относительные, можно объяснить тем, что абсолютные значения более зависимы от значения общего лейкоцитарного показателя и поэтому интактные и значения после введения иммунодепрессанта более значимо изменялись, чем относительные.

Изменения в значениях эритроцитарных и тромбоцитарных клеток регистрировались, но более, чем 2-х кратного снижения не было зарегистрировано. Уровень эритроцитарных клеток (6,5±1,56)·1012/L крови достиг значения (4,93±1,3)·1012/L крови, т.е. снижение наблюдалось в 1,32 раза. Уровень гемоглобина упал в 4,51 раза. У интактных животных он составлял 140,7 ± 16,7 г/L крови. И после интоксикации упал до 90,75±12,0 г/L крови. Но гематокритные значение со значения (39,8±6,3) упало в 2,88 раза (Р≤0,05) раза, достигнув значения (21,21± 2,58).

Критическое снижение наблюдалось среди тромбоцитов .Уровень интактных животных составлял (660,25±91,21)·109/L крови и при искусственно вызванном иммунодепрессивном синдроме составил (70,5±43,2)·109/L крови, что составило более 9,36-кратное снижение (Р≤0,01).

Вызвав искуственный иммунодепрессивный синдром животных пролечили новыми соединениями растительного происхождения. Соединения были исследованы под следующими шифрами: Соляноколосник прикаспийский (Holostachys caspia) водный экстракт-ИЕС.СПП.401Р, Соляноколосник прикаспийский (Holostachys caspia) 50 % водно – этиловый экстракт-ИЕС.СПП.401Р.СЭ, Сведа мелколистная (Sueda microphilla) водный экстракт-СИЕ.СМ.401Р, Сведа мелколистная (Sueda microphilla) 50 % водно – этиловый экстракт-СИЕ.СМ.401Р.СЭ, Климакоптера туполистная (Climacoptera obbtusifolia) 70 % водно – этиловый экстракт-G.COEX, Климакоптера шерстистая (Climacoptera lanata) 70 % водно – этиловый экстракт-G.CLEX, Климакоптера толстоватая (Climacoptera subcrassa) водный экстракт-A.SKF Климакоптера толстоватая (Climacoptera subcrassa) 50 % водно – этиловый экстракт-A.CSEX.

Проведя анализ полученных данных можно выделть в первую очередь соединения СИЕ.СМ.401Р, СИЕ.СМ.401Р.СЭ, полученные из растения Сведа мелколистная (Sueda microphilla). Следует отметить, что значимо выделялись по активности соединения, полученные водно-этиловым экстрагированием растений, чем просто водным экстрагированием. Показатели крови животных, получавших соединение СИЕ.СМ401Р.СЭ. В первую очередь следует отметить, что уровень лейкоцитарных клеток вырос до (5,64±0,03)·109/L крови, против значения контрольных животных (2,79±0,65)·109/L крови, т.е.в 2,02 раза. Следует отметить, что соединение СИЕ.СМ.401Р.СЭ. значимо стимулировало деление гранулоцитов, чем агранулоцитов. Мало влияло на значения лимфоцитарных клеток. После проведенного лечения соединением абсолютное значение лимфоцитов составило (1,49±0,02)·109/L крови против контрольного значения (1,55±0,25)·109/Lкрови, т.е. даже контрольное значение выше. А относительные значения лимфоцитов в группе введения соединения СИЕ.СМ.401Р.СЭ даже в 1,93 раза были меньше контрольных (26,27±2,28) % против (50,65±8,36) %. А вот уровень гранулоцитарных лейкоцитов, как абсолютные, так и относительные значения значимо выросли в группе введения соединения СИЕ.СМ.401Р.СЭ. Абсолютное значение гранулоцитов в группе введения соединения СИЕ.СМ.401Р.СЭ составило (26,27±2,28)·109/L против контрольного значения (1,13±0,0)·109/L крови т.е. в 23,25 раза (р≤0,01) превышая контроль. Относительное значение в группе введение соединение СИЕ.СМ.401Р.СЭ также превосходило контрольные значение в 1,45 раза.

Значимых отличий в значениях эритроцитарных клеток не было зарегистрировано, ни в общем эритроцитарном показателе, ни в гемоглобине, гематокрите и т.д. Следует отметить изменения в уровне тромбоцитарных клеток, так против контрольного показателя (447,0±127,2)·109/L крови в группе введения СИЕ.СМ.401Р.СЭ он составил (600,0±90,1)·109/L крови.

Показатели гемограммы в группе введения водного аналога СИЕ.СМ.401Р были не то, что выше значений контрольной группы, а даже на несколько параметров ниже, в 1,3-2,4 раза. Например уровень лейкоцитов в группе введения соединения СИЕ.СМ.401Р был (1,31±0,33)·109/L крови против контрольного значения (2,79±0,56)·109/L крови. Также все показатели лейкограммы, как относительные, так и абсолютные, уступали контрольным значениям. Аналогичная картина наблюдалось в значениях эритроцитарных и тромбоцитарных клеток.

Абсолютно аналогичную картину можно увидеть в группах введения соединений ИЕС.СПП.401Р.СЭ. Общий лейкоцитарный показатель в группе введения ИЕС.СПП.401Р.СЭ. составил (4,96±1,23)·109/L крови против контрольного значения (2,79±1,23)·109/L крови. Относительное значение гранулоцитов составило (51,53±2,53) % против контрольного показателя (43,35±3,35) %. Значимых отличий в показателях моноцитов и лимфоцитов зарегистрировано не было [9, 10].

Следует отметить следующее соединения G.COEХ при общем лейкоцитарном показателе (4,71±1,21)·109/L крови против контрольного значения (2,79±1,23)·109/L крови. Но значимого увеличения ни агранулоцитов, ни гранулоцитов не было зарегистрировано. Лишь на 2-7 % отличались значения в группе введения соединения G.COEX, превышая показатели контрольной группы. А уровень эритроцитарных и тромбоцитарных клеток был даже ниже контрольных значений. Особенно уровень гемоглобина составлял (23,29±2,31)г/L крови против контрольного значения (96,0±12,2) г/L крови. Уровень тромбоцитов составлял (393,33±121,2)·109/L крови против показателя контрольной группы (447,0±92,1)·109/L крови.

В ряду соединений растительного происхождения самые плохие результаты по миелостимулирующей активности показало соединение ASCEX. Значения лейкоцитарных, эритроцитарных, тромбоцитарных клеток были ниже показателей контрольной группы в 3,21-27,84 раза (Р≤0,01). В большей степени пострадали тромбоцитарные клетки, а так же соответственно уровень тромбокрита. Можно предположить, что данное соединение обладает цитостатическим действием, что и усугубило действие иммунодепрессанта. Также можно предположить, что соединения ASKF и GCLEX также подавляют пролиферативную активность кроветворных пулов костного мозга, что и повлекло за собой снижение уровня клеток в периферической крови даже ниже уровня контрольной группы [6,7,8].

Таким образом, водно-спиртовые экстракты растений Соляноколосника прикаспийского и Сведы мелколистной обладают миелостимулирующим действием на гранулоцитарные лейкоциты. Не влияют на лимфоцитарные показатели. Соединения, полученные из растений Климакоптера туполистая, шерстистая, толстоватая обладают противоположным действием – подавляют пролиферативную активность клеток, т.е. обладают цитостатическим действием, но это требует дополнительного исследования (желательно у онкологов, которые изучают цитостатики на культуре раковых клеток).