Увеличение количества заболеваний желчевыводящих путей создает потребность в новых препаратах желчегонного действия. В связи с тем, что синтетические препараты довольно часто дают нежелательные побочные действия, средства растительного происхождения являются хорошей альтернативой в терапии данных болезней. В гастроэнтерологии при заболеваниях печени и желчевыводящих путей очень широко применяются желчегонные препараты.
Основными патологическими процессами, при которых широко используются желчегонные препараты, являются заболевания билиарной системы и, в первую очередь, первичные и вторичные дискинезии желчевыводящих путей.
Патология билиарного тракта занимает одно из центральных мест в современной гастроэнтерологии. Это обусловлено широким распространением как функциональных, так и органических заболеваний желчного пузыря и желчных путей. Функциональные заболевания билиарного тракта являются основными в формировании клинической симптоматики как при первичных функциональных нарушениях, протекающих в виде самостоятельной патологии, так и при вторичных дисфункциях, являющихся следствием заболевания органического характера [2]. Горец сахалинский содержит значительное количество фенилпропаноидов обладающих желчегонным действием [1].
Материалы и методы исследования
Объектом исследования явился лабораторный образец сухого экстракта травы г. сахалинского.
Определение острой токсичности проводили по методу Кербера, описанному в официальном руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ под редакцией В.П. Фисенко [3]. Острая токсичность изучалась на мышах массой 25±1,0 г. При изучении токсического действия per os исследуемый экстракт вводили интрагастрально мышам в дозах: 5000 мг/кг, 2500 мг/кг, 1250 мг/кг. Запаивали мышей экстрактом методом принудительного зондирования per os в теплом (37,0±0,1 0С) виде. Острую токсичность определяли по оценке выживаемости мышей и по рассчитанной среднесмертельной дозе.
После введения внутрь экстракта в разных дозах оценивали состояние мышей. Критериями оценки острой токсичности служили картина интоксикации и выживаемость животных в течение 48 часов. Дальнейшее наблюдение проводили в течение 2-х недель, причем в первый день после введения животные находились под непрерывным наблюдением. Для определения действия экстракта на организм мышей, проводили параллельные исследования с использованием воды очищенной в эквивалентном объеме. Эксперименты по определению желчегонного действия проводили in vivo на белых половозрелых крысах самцах линии Wistar, 7-месячнго возраста весом 300±20 г, наркотизированных хлоралгидратом (300 мг/кг). Опытные группы животных получали изучаемый экстракт в виде лекарственной формы перорально. В качестве препарата сравнения использовали зарегистрированный препарат фламин (50 мг, таблетки) производства (ЗАО «ВИФИТЕХ» Россия). Животные были разделены на 3 группы:
1 – группа (контроль) – животные получившие изотонический раствор натрия хлорида – 6 крыс;
2 – группа (опыт) – животные получившие экстракт – 6 крыс;
3 – группа (опыт) – животные получавшие препарат сравнения фламин – 6 крыс;
Для сбора желчи готовили фистулу желчного протока. Перед собиранием желчи животные отдыхали свободно 30-40 мин (желчь оттекала свободно). Для получения контрольных данных желчь собирали в группе контрольных животных получавших изотонический раствор натрия хлорида в эквивалентном объеме. Исследование проводили в течение 5 часов. Общий объем желчи регистрировали каждый час, что позволяет оценить количественный эффект исследуемых препаратов и относительную продолжительность действия препаратов [3, 5].
Результаты исследования и их обсуждение
О степени токсичности экстракта судили по изменению общего состояния мышей (внешний вид, поведенческая реакция, активность, частота дыхания, состояние рефлекторной деятельности, пробы на болевое раздражение, потребление пищи) и гибели животных. Общая длительность наблюдения составила 14 дней. В первые 6 часов животные находились под непрерывным наблюдением. Следует отметить, что в первые 15 минут после введения экстракта у всех животных отмечалась вялость, заторможенность, учащенное дыхание и отказ от воды и пищи, что может быть реакцией на введение.
По истечении 15 минут указанные выше явления проходили, и животные чувствовали себя нормально. В течение двух последующих недель не наблюдалось гибели ни одного животного.
Проведенные в течение двух недель наблюдения за выжившими животными: двигательная активность; наличие судорог; координация движений, реакция на раздражители; тонус скелетной мускулатуры; дыхание; состояние кожного покрова, шерсти и окраска видимых слизистых оболочек; потребление воды и пищи; масса тела, не выявили заметных отклонений по сравнению с интактными животными. Токсичность экстракта при применении per os отсутствует. Это свидетельствует о безопасности изучаемого экстракта. Данный факт следует из результатов, предоставленных в таблице 1. По по Hodge и Sterner и таблице Сидорова К.К. этот показатель соответствует классу IV – практически нетоксичным веществам [4].
Результаты эксперимента определения желчегонного действия представлены в табл. 2.
Таблица 1
Определение острой токсичности экстракта г. сахалинского на мышах-самцах
|
Результат |
Доза мг/кг |
||
|
1250 |
2500 |
5000 |
|
|
Кол-во животных Выжило Погибло |
6 6 0 |
6 6 0 |
6 6 0 |
|
Z |
0 |
0 |
|
|
D |
1250 мг |
2500мг |
|
|
DZ |
0 |
0 |
|
Примечание. Z – показатель разницы между количеством погибших животных при использовании двух соседних доз; D – показатель разницы между количеством двух соседних доз.
Таблица 2
Оценка влияния на холеретическую реакцию у белых крыс M±m, N=6
|
Группа животных |
Скорость секреции желчи мл/час на 100 г, |
Общее кол-во желчи за время эксперимента |
||||
|
1 час |
2 часа |
3 часа |
4 часа |
5 часов |
||
|
Контроль |
0,34±0,02 |
0,32±0,015 |
0,30±0,009 |
0,28±0,018 |
0,25±0,012 |
1,49±0,015 |
|
Фламин 5 мг/кг |
0,41±0,018 |
0,40±0,02 |
0,39±0,016 |
0,38±0,014 |
0,36±0,02 |
1,94±0,014 |
|
Экстракт г.сахалинского 15 мг/кг |
0,40±0,015 |
0,42±0,016 |
0,41±0,04 |
0,40±0,12 |
0,38±0,016 |
2,01±0,012 |
Результаты эксперимента свидетельствовали о том, что экстракт г. сахалинского сухой проявляет умеренную желчегонную активность и превосходит по активности официнальный препарат фламин на 3,6 %. В частности, скорость секреции желчи в группе животных получавших экстракт возрастала по сравнению с контролем на 31,2 % через 2 часа после его введения и сохранялась повышенной в течение всего периода наблюдения.
Заключение
Проведенные исследования позволяют сделать заключение об отсутствии токсичности экстракта травы горца сахалинского и наличию у него важного для медицинской и фармацевтической науки желчегонного действия.