Научный журнал

Международный журнал экспериментального образования

ISSN 2618–7159

ИФ РИНЦ = 0,425

• Авторы
• Файлы
• Литература

Мышкин В.А. 1 Срубилин Д.В. 1 Еникеев Д.А. 1

---

1 ФГБОУ ВО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России

Статья в формате PDF

0 KB

1. Берстон М. Гистохимия ферментов. – М.: Мир, 1965. – 390 с.

2. Берхин Е.Б., Иванов Ю.И. Методы экспериментального исследования почек и водно-солевого обмена. – Барнаул, 1972. – 280 с.

3. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. – М.: Медицина, 1972. – 252 с.

4. Волчегорский И.А. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций оргпнизма / И.А. Волчегорский, И.И. Долгушин, О.А. Колесников. – Челябинск, 2000. – 160 с.

5. Гаврилов В.Б. Спектрофотометрическое определение содержания перекисей липидов в плазме крови / В.Б. Гаврилов, М.Н. Мишкорудная // Лабораторное дело. – 1983. – № 3. – С. 33–36.

6. Пирс Э. Гистохимия: теоритическая и прикладная. – М.: Мир, 1962. – 929 с.

7. Тутельян В.А. Полихлорированные бифенилы / В.А. Тутельян, Н.В. Лашнева. – М.: Центр международных процессов ГКНТ, 1988. – Вып. 107. – 62 с.

Известно, что процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) являются ключевым звеном ряда патофизиологических процессов, в том числе таких, как токсическое повреждение [3]. Полихлорированные бифенилы (ПХБ) способны индуцировать процессы свободно-радикального окисления в печени, в центральной нервной системе, клетках крови, тканях репродуктивных органов, слизистой оболочке желудка, кишечника, поджелудочной железе [7]. При этом отсутствуют экспериментальные данные о роли процессов ПОЛ при повреждении почек в условиях экспериментального отравления ПХБ. В настоящей работе исследована активность реакций ПОЛ и функциональное состояние почек в условиях субхронической интоксикации ПХБ.

Материалы и методы исследования

Эксперименты проведены на белых крысах-самцах массой 180–240 г. Эксперименты проводились в соответствии с требованиями приказов № 1179 МЗ СССР от 10.10.83 г., № 267 МЗ РФ от 19.06.03 г. «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных», «Правила по обращению, содержанию, обезболиванию и умерщвлению экспериментальных животных». Поражение почек вызывали путем введения животным опытной группы коммерческого препарата ПХБ «Совтол», включающего смесь тетра-, пента-, гексахлорбифенолов и тетрахлорбензола. Токсикант вводили в желудок крыс с помощью специального металлического зонда в суммарной дозе 600 мг/кг в течение 28 дней. Животным контрольной группы вводили оливковое масло. На 30 сутки эксперимента после декапитации под легким эфирным наркозом у крыс собирали кровь, извлекали почки. Уровень диеновых конъюгатов (ДК) определяли спектрофотометрическим методом [4, 5]. ТБК-реагирующие продукты (ТБК-РП) – методом И.Д. Стальной и Т.Г. Гаришвили [4]. На криостатных срезах ткани почек определяли содержание липидов с помощью окраски суданом черным [1], на парафиновых срезах – содержание гликогена по методу Мак-Мануса-Хочкина [6]. В ткани почек исследовали активность лактатдегидрогеназы (ЛДГ), щелочной фосфотазы (ЩФ) методом азосочетания по М. Берстону [1]. Количественную оценку результатов гистохимических исследований проводили на цитоспектрофотометре (микроскоп с анализатором МТ-9 «ЛОМО») при длине волны 546 нм (ЛДГ), 520 нм (ЩФ) и 340 нм (липиды) на площади зонда 0,8 мкм2. Диурез животных исследовали в течение 3 часов после водной нагрузки [2]. Концентрацию белка в моче определяли методом Лоури [МУК 4.1/4.2.588–96], хлоридов методом Фольгардта, глюкозы – глюкозо-оксидазным методом. Активность ЩФ и ЛДГ определяли на биохимическом анализаторе «Spectrum» (США). Статистическую достоверность результатов исследования оценивали с помощью t-критерия Стъюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

Результаты изучения повреждающих эффектов ПХБ на почки представлены в таблице. Введение крысам токсиканта сопровождалось существенным нарушением процессов ПОЛ в почках. Так в 2,2 раза (p < 0,05) увеличилось количество ДК и в 1,5 раза – содержание ТБК-РП (p < 0,05) по сравнению с показателями у интактных животных. Как известно, ПХБ, обладая высокими липофильными свойствами, легко проникают внутрь клетки, растворяясь во внутриклеточных липидах, нарушают метаболизм, блокируют ферментные системы, что приводит к нарушению клеточных элементов, возникновению жировой дегенерации и дистрофии с последующим развитием некрозов [10]. Гистохимический анализ почечной ткани и биохимическое исследование мочи свидетельствуют о том, что после воздействия ПХБ уровень липидов в ней увеличился более чем в 2 раза (p < 0,05), подавлялась активность ЛДГ и ЩФ. На этом фоне снижался диурез, развивались глюкозурия, протеинурия. Поскольку ЛДГ локализуется в цитоплазме нефроцитов, а ЩФ – в мембранах клеточной каймы, то повышение уровня данных ферментов в моче следует расценивать, как признак повреждения почечных канальцев.

Диурез, биохимические показатели мочи и почек при субхронической интоксикации крыс совтолом (М ± m)

Примечания: * – достоверно p < 0,05; ** – достоверно p < 0,01; *** – достоверно p < 0,001.

Усиление активности ПОЛ в почках в условиях токсического действия ПХБ может быть связано со сменой динамических фаз адаптационной перестройки антиоксидантных ресурсов и срывом компенсаторных механизмов. Поражение почек на фоне интенсификации в них процессов ПОЛ свидетельствует о центральной роли окислительного стресса, что может быть одним из ведущих механизмов токсического поражения почек ПХБ. С учетом полученных результатов при разработке комплекса патогенетически обоснованных лечебно-профилактических мероприятий следует учитывать нарушения процессов ПОЛ в почках.

Библиографическая ссылка