В последние десятилетия в экспериментальных медико-биологических исследованиях все большее внимание уделяется сложным дорогостоящим гистохимическим и иммуноморфологическим методам изучения материала от животных моделей [Kulbatski, et al., 2007], в то время как классические морфологические методы исследования отходят на второй план [Pavlovich, et al., 2012]. Кроме того, в этих работах наиболее распространенными являются физиологические и биохимические методы, которые позволяют получать непрерывные данные для одних и тех же животных, что принципиально невозможно при их морфологических исследованиях, в которых для изучения строения органов, тканей и клеток, приходится забивать животное [Пелогейкина с соавт., 2015]. Последнее увеличивает необходимое минимальное количество исследуемых животных, что удорожает морфологическое исследование, проводимое часто на дорогостоящих линейных грызунах [Павлович с соавт., 2013; Рябов с соавт., 2014]. Исследование стабильных клеточных популяций (кардиомиоцитов, нейронов) в различных органах животных (сердце, спинной мозг) в экспериментах по их восстановлению после повреждений [Писаренко с соавт., 2013-2015; Smirnov, et al., 2014] требует применения комплексных медико-биологических исследований при использовании клеточных и гуморальных факторов регенерации и не может обойтись без прямых морфологических оценок их состояния. В этом ряду наиболее важными и информативными являются методики светооптического исследования полутонких срезов органов и тканей, а также электронно-микроскопического исследования клеток, их контактов и субклеточных структур. Эти работы требуют применения не только альдегидных фиксаторов, но и четырехокиси осмия для улучшения условий сохранности тканей, клеток и органелл, а также повышения контрастности изучаемого материала в норме и в экспериментах. Использование более дешевых и менее трудоемких методов изучения спинного мозга при светооптическом анализе материала (без осмирования), часто дает худшие результаты при исследовании миелинизированных нервных волокон [Павлович с соавт., 2015 а, б], так как при этом не сохраняется неизменной миелиновая оболочка этих волокон и невозможно понять характер регенерации при применении клеточных технологий. Неудобством осмирования нервных тканей является их низкая проницаемость для четырехокиси осмия, что требует разработки ряда ухищрений для полноценной фиксации [Павлович, Просвирнин, 2013]. К таким ухищрениям относится разрезание спинного мозга на мелкие слайсы толщиной 1 мм или поперечную резку с более крупных кусков на глубину до 0,2 мм, что хватает для получения полутонких или ультратонких срезов, используемых для морфологических исследований биологического материала от экспериментальных животных. Подобный прием может использоваться и для исследования стенок различных камер сердца, что позволит получать данные о послойном строении мышечных волокон этого органа, как в норме, так и в различных экспериментах [Павлович, 2013] при светооптических и электронно-микроскопических исследованиях. Имея прямые данные о строении этих органов проще разобраться с результатами гистохимических и иммуноморфологических исследований.
Библиографическая ссылка
Павлович Е.Р. РОЛЬ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В СОВРЕМЕННЫХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ РАБОТАХ // Международный журнал экспериментального образования. – 2016. – № 5-2. – С. 211-211;URL: https://expeducation.ru/ru/article/view?id=9980 (дата обращения: 21.11.2024).